Jackson艾美捷区分细胞类型和原代培养方案

“当用密切相关物种的抗体标记多个靶点时，你真的需要确定你的二级抗体是特异性的！”

请继续阅读，了解心脏病研究人员Elisabeth Ehler如何使用Jackson ImmunoResearch交叉吸附（最小X）二级抗体与来自密切相关宿主物种的一级抗体进行多重标记，从而使她能够在原代心脏细胞培养物中区分细胞类型。

自2003年以来，埃勒博士一直是伦敦国王学院医学系的非临床高级讲师。她的研究在亚细胞水平上探索心脏细胞（心肌细胞）的组织；主要从细胞骨架和信号转导的角度。这使她能够阐明心脏发育过程中细胞结构的组装，以及如何适应增加的工作量或心脏病期间。

她的研究旨在回答的主要问题是：

肌原纤维和闰盘在发育过程中是如何在心肌细胞中组装的？

病变心脏中的肌原纤维和闰盘如何（如果）受到影响？

心肌细胞在发育过程中适应性的功能基础是什么？

Jackson艾美捷测定原代培养物中的不同细胞类型。 

通过抗体探测细胞类型特有的蛋白质标记物，可以区分不同的细胞类型。使用针对每种一级抗体的不同宿主物种的二级抗体可以检测到多种标记物。与二级抗体结合的不同颜色荧光探针可以识别每个标记，从而识别每个细胞类型。

初级抗体通常仅在有限的物种中可用，并且可能无法避免使用密切相关的物种，如小鼠和大鼠。因此，重要的是你的二级抗体交叉吸附，以防止标记物的错误识别。

图1显示了原代细胞培养中可能存在的各种细胞，“并非所有细胞都是心肌细胞，这是显示次级抗体有多特异的关键！！！”埃勒博士说。Jackson ImmunoResearch交叉吸附的二级抗体使密切相关的一级抗体宿主物种得以区分，从而能够检测到不同的细胞类型标记，并最终识别出细胞类型。使用大鼠抗微管蛋白（红色）检测原代心肌细胞培养物中的成纤维细胞，使用小鼠抗结蛋白（蓝色）检测平滑肌细胞，当使用兔抗肌球蛋白结合蛋白C（MyBP-C）（条绿色信号）检测时，这两种细胞都不会染色，这是心肌细胞特异性的。

Jackson艾美捷 精细的特异性——区分老鼠和老鼠。

埃勒博士的工作清楚地显示了杰克逊免疫研究交叉吸附（minX）二级抗体在区分小鼠和大鼠一级抗体的能力方面的独特性。在图3中，使用肌球蛋白结合蛋白-C（MyBP心脏）探测细胞，以识别心肌细胞（绿色）。图中显示了一个红色和蓝色的细胞，微管蛋白（红色）和结蛋白（蓝色）均呈阳性，但没有绿色条纹表明这是一个平滑肌细胞。左边的红色邻居是一个不起眼的成纤维细胞，鼠抗微管蛋白呈阳性。只有当二级抗体能够区分密切相关的物种时，才能实现细胞类型之间的分化。

Jackson相关研究：

Cy™2 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)(minX Hu, Ms, Rat Sr Prot) Green 111-225-144

Cy™3 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG (H+L)(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Shp Sr Prot) Red 712-165-153

Cy™5 AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Rat, Shp Sr Prot) Blue 715-175-151