lonza培养基产品使用说明书

培养基进化史

传统培养基的缺陷

传统的细胞培养中需要添加含血清的培养基，而血清的主要作用是在于给细

胞提供生长增殖所需的激素、生长因子、转移蛋白和其他营养物质。

但血清也给生产和科研带来了诸多不利的因素：

 不同血清间，批间差异影响较大；

 成分不明确；

 具有抑制生长的成分；

 不利于疫苗和单克隆抗体等产品的分离纯化等。

无血清培养

无血清培养：用不含血清的培养基对细胞进行培养。

无血清培养基：不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间的生长繁殖的合成培养基。

应用：

 培养贴壁和非贴壁哺乳动物细胞

 制备单克隆抗体

 制备病毒抗原 制备重组蛋白

无血清培养的主要成分

无血清培养基的组成：基础培养基和添加组分两部分组成，添加组分一般含有生长

因子、激素、酶抑制剂、结合蛋白和转运蛋白以及一些微量元素等。

 激素（如胰岛素）：胰岛素可以促进RNA、蛋白质和脂肪酸的合成，抑制细胞凋亡，

是重要的细胞存活因子。有研究认为胰岛素迅速耗尽是细胞生长速率下降的主要原因。

 生长因子：是维持细胞体外培养生存、增殖和分化所必需的补充因子。如表皮生长因子（EGF）、成纤维生长因子（FGF）和神经生长因子（NGF），是有效的促有丝分裂原，能缩短细胞群体倍增时间。

 结合蛋白：主要是白蛋白和转铁蛋白，白蛋白能够与维生素、脂类、激素、金属离子和生长因子结合并调节其在无血清培养基中的活性，还能够结合毒素和减轻蛋白酶对细胞影响的作用；转铁蛋白和细胞表面的转铁受体结合，为细胞提供必需的微量元素铁。

 贴壁因子：绝大多数的动物细胞体外培养需要固着在基质上，无血清培养基中常添加纤黏蛋白等促进细胞贴壁及铺展。

 酶抑制剂：部分细胞在酶处理后有酶残留，酶抑制剂的存在会达到保护细胞的效果。

 微量元素：硒等。

无血清培养的优缺点

优点：

可以避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性；

避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染；

避免血清组分对实验研究的影响；

有利于体外培养细胞的分化；

可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化、降低成本；

不含有丝分裂原抑制剂，可以促进细胞增殖。

缺点：

专一性：针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。

UltraCulture培养基概述

UltraCULTURE™培养基（12-725F）是一种通用型无血清培养基，用于培养多种哺乳动物细胞类型。

UltraCULTURE™培养基主要DMEM：F-12、重组人胰岛素、牛转铁蛋白和牛血清蛋白混合物（包括白蛋白）组成。

UltraCULTURE™培养基的总蛋白质浓度约为3mg / ml，不含L-谷氨酰胺，因此使用时每500mL培养基需要添加200mM的L-G（17-605）

5mL。

UltraCULTURE ™培养基已经在FDA备案。

UltraCulture培养基应用

培养多种哺乳动物的原代细胞和确立细胞株（包括单核细胞、巨噬细胞细胞系、上皮细胞和成纤维细胞；UltraCULTURE培养基添加

5%的胎牛血清也能够用于内皮细胞的培养）

在杂交瘤形成期间促进细胞融合；疫苗生产中促进病毒颗粒的产生；

可以添加防冻剂（12-132A）后在无血清环境冻存细胞。

注意：

UltraCULTURE™培养基可能会出现浑浊，但不影响使用（使用过程中导致的污染不涵盖在内）。

参考文献

 Jang Hwan Cho(2018).Universal Chimeric Antigen Receptors for Multiplexed and Logical Control of

T Cell Responses.—UltraCulture添加2mM L-G、200U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、1mM丙酮

酸钠、5mM丁酸钠培养转染后的HEK293制备慢病毒，收集病毒后，接种到用X VIVO 15培养的T细胞进行后续实验。

 Nathalie Meuleman (2006).Human marrow mesenchymal stem cell culture: serum-free medium allows better expansion than classical a-MEM medium.—UltraCulture添加2% Ultroser G（PALL）、2mM

L-G、1%抗生素-抗真菌药培养MSC，培养的细胞数量和细胞的多功能性均比添加15%FBS的α-MEM好。

 Oksana Lockridge(2018).Comparison of Hupresin® to procainamide-Sepharose for purification of

butyrylcholinesteraseand acetylcholinesterase.—培养CHO，用于表达部分糖基化人丁酰胆碱酯酶

 Hua-Jiang Dong(2017).The Distribution of Transplanted Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells in

Large Blood Vessel of Rats With Traumatic Brain Injury.—用于培养人脐带间充质干细胞

 Ming Zhu, (2017).Curcumin protects mesenchymal stem cells against oxidative stress-induced apoptosis via Akt/mTOR/p70S6K pathway.— 用于大鼠来源MSC的培养

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